在現(xiàn)代替物技術(shù)的舞臺(tái)上,限制性核酸內(nèi)切酶AccI是一位備受矚目的“明星”。它是一種能夠特異性識(shí)別并切割DNA的酶,憑借其精細(xì)的切割能力,在基因工程領(lǐng)域扮演著不可或缺的角色。AccI的識(shí)別序列是“GT^AC”,這意味著它會(huì)在DNA雙鏈上找到這一特定的核苷酸序列,并在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷。這種切割方式非常獨(dú)特,它會(huì)產(chǎn)生黏性末端,即切割后的DNA片段兩端會(huì)暴露出一段互補(bǔ)的單鏈區(qū)域。這種黏性末端的特性使得AccI在基因克隆和重組DNA技術(shù)中大顯身手。在基因工程中,科學(xué)家們常常需要將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中分離出來,并將其插入到合適的載體中。AccI可以像一把“精細(xì)刻刀”一樣,將目標(biāo)基因和載體DNA在特定位置切割,暴露出的黏性末端能夠通過堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式相互結(jié)合,再利用DNA連接酶將它們連接起來,從而構(gòu)建出重組DNA分子。AccI的應(yīng)用不僅局限于基因克隆,它還在基因分析和診斷中發(fā)揮著重要作用。通過AccI對(duì)DNA的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,幫助診斷某些遺傳性疾病。此外,AccI還可以用于構(gòu)建基因文庫(kù),為研究基因功能和進(jìn)化提供了重要的工具。AccI的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)發(fā)展的重要里程碑。 其作用位點(diǎn)相對(duì)局限,主要作用于高甘露糖型和部分雜合型 N - 連接糖鏈,對(duì)于復(fù)雜型 N - 連接糖鏈的作用較弱。Recombinant Human NAP-2/CXCL7
dNTP/dUTP Mixture是一種特殊的核苷酸混合物,包含四種脫氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脫氧尿苷三磷酸(dUTP),其中每種dNTP濃度為2.5 mM,dUTP濃度為5 mM。這種獨(dú)特的配方使其在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,尤其是在需要結(jié)合傳統(tǒng)DNA合成與尿嘧啶標(biāo)記的場(chǎng)景中。產(chǎn)品特點(diǎn)dNTP/dUTP Mixture結(jié)合了傳統(tǒng)dNTP和dUTP的優(yōu)勢(shì),提供了一種多功能的DNA合成試劑。其配方中dNTP濃度為2.5 mM,dUTP濃度為5 mM,能夠滿足常規(guī)PCR、DNA標(biāo)記、基因編輯等多種實(shí)驗(yàn)需求。這種混合物經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保純度和穩(wěn)定性,能夠?yàn)镈NA合成提供高質(zhì)量的原料保障。此外,dUTP的存在為實(shí)驗(yàn)提供了額外的功能,例如通過尿嘧啶標(biāo)記實(shí)現(xiàn)DNA的特異性檢測(cè)或后續(xù)處理。這種混合物的高濃度設(shè)計(jì)減少了實(shí)驗(yàn)中試劑的添加量,降低了污染風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)便于實(shí)驗(yàn)人員根據(jù)具體需求進(jìn)行稀釋和使用。應(yīng)用場(chǎng)景dNTP/dUTP Mixture廣應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR反應(yīng):在常規(guī)PCR中,dNTP/dUTP Mixture可用于DNA擴(kuò)增,同時(shí)引入dUTP標(biāo)記,便于后續(xù)的DNA檢測(cè)或熱啟動(dòng)應(yīng)用。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)和熒光染料,為效率、準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs、增強(qiáng)劑以及熒光染料。其優(yōu)點(diǎn)在于熱啟動(dòng)技術(shù)的應(yīng)用。通過在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴(kuò)增,以及對(duì)特異性要求較高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。熒光染料的加入是該預(yù)混液的另一大亮點(diǎn)。這種染料在PCR過程中能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,還減少了人為操作帶來的污染風(fēng)險(xiǎn),尤其適合高通量的基因檢測(cè)和定量分析。此外,該預(yù)混液的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。
重組人JAM-A蛋白(Recombinant Human JAM-A Protein, His Tag)是一種重要的細(xì)胞粘附分子,屬于免疫球蛋白超家族成員,廣表達(dá)于上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及血小板表面。JAM-A(Junctional Adhesion Molecule A)在維持細(xì)胞間緊密連接、調(diào)節(jié)血管通透性、參與炎癥反應(yīng)及血小板功能等方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。該重組蛋白通過真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)等。JAM-A在多種生理和病理過程中發(fā)揮重要作用,包括白細(xì)胞遷移、血管生成及病轉(zhuǎn)移等。研究表明,JAM-A的表達(dá)水平與多種疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān),如炎癥性腸病、及某些惡病。因此,重組人JAM-A蛋白不僅是研究細(xì)胞連接和炎癥機(jī)制的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持。再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。
重組人Latexin蛋白(Recombinant Human Latexin Protein, His Tag)是一種天然存在于哺乳動(dòng)物組織中的羧肽酶抑制劑,主要在神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和某些外周組織中表達(dá)。Latexin是目前已知的只有一種能夠特異性抑制羧肽酶A(CPA)和羧肽酶B(CPB)活性的內(nèi)源性蛋白,在調(diào)控蛋白質(zhì)降解、細(xì)胞分化及炎癥反應(yīng)等過程中發(fā)揮重要作用。該重組蛋白通常采用大腸桿菌或真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,N端帶有His標(biāo)簽,便于通過Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。His標(biāo)簽的引入不僅提高了蛋白的溶解性,也便于后續(xù)的Western blot、ELISA、酶活性抑制實(shí)驗(yàn)及蛋白相互作用研究。研究表明,Latexin在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、干細(xì)胞維持及病抑制中具有潛在功能。例如,在神經(jīng)干細(xì)胞中,Latexin可能通過調(diào)控蛋白酶活性影響細(xì)胞命運(yùn)決定;在某些病中,其表達(dá)水平與病進(jìn)展呈負(fù)相關(guān),提示其可能具有抑病作用。因此,重組人Latexin蛋白不僅是研究蛋白酶調(diào)控機(jī)制的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有廣的科研和臨床應(yīng)用前景。其快速擴(kuò)增能力和高特異性使其特別適合大規(guī)?;驒z測(cè)、菌落PCR以及微量DNA的檢測(cè)。DNA Marker V
Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。Recombinant Human NAP-2/CXCL7
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來,科學(xué)家們通過對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。Recombinant Human NAP-2/CXCL7