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在生物技術(shù)的微觀世界里,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程中不可或缺的工具,而AflII便是其中一位“精細(xì)剪刀手”。它是一種能夠特異性識(shí)別并切割DNA的酶,憑借其高度的特異性和精細(xì)的切割能力,在現(xiàn)代替物技術(shù)中發(fā)揮著重要作用。AflII的識(shí)別序列是“C^TTAAG”,這意味著它會(huì)在DNA雙鏈上尋找這一特定序列,并在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷。這種切割方式會(huì)產(chǎn)生黏性末端,即切割后的DNA片段兩端會(huì)暴露出一段互補(bǔ)的單鏈區(qū)域。這種特性使得AflII在基因克隆和重組DNA構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AflII的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家們可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來(lái),就像從一幅巨大的拼圖中精確地取出需要的那一塊。隨后,通過(guò)DNA連接酶,將切割后的基因片段與載體DNA連接起來(lái),構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過(guò)程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而AflII的黏性末端特性正好滿足了這一需求。AflII的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過(guò)觀察AflII對(duì)不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。
重組人KLRG1蛋白(Recombinant Human KLRG1 Protein, hFc Tag)是一種重要的免疫調(diào)節(jié)分子,屬于C型凝集素樣受體家族,主要表達(dá)于自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)和活化的T細(xì)胞表面。KLRG1(Killer Cell Lectin-like Receptor G1)通過(guò)與鈣粘蛋白家族成員(如E-cadherin、N-cadherin)結(jié)合,傳遞抑制性信號(hào),從而調(diào)控免疫細(xì)胞的活性,在維持免疫穩(wěn)態(tài)、防止過(guò)度免疫反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該重組蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其C端融合了人IgG Fc(hFc)標(biāo)簽,不僅提高了蛋白的穩(wěn)定性和溶解性,還便于通過(guò)Protein A親和層析進(jìn)行高效純化。此外,hFc標(biāo)簽還可用于免疫共沉淀、流式細(xì)胞術(shù)及體內(nèi)功能研究等實(shí)驗(yàn)。KLRG1在免疫衰老、慢性沾染及腫瘤免疫逃逸等過(guò)程中具有重要作用。研究表明,KLRG1表達(dá)水平與T細(xì)胞耗竭密切相關(guān),是評(píng)估免疫細(xì)胞功能狀態(tài)的重要標(biāo)志物。因此,重組人KLRG1蛋白不僅是研究免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的重要工具,也為開(kāi)發(fā)免疫治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。MluI限制性內(nèi)切酶UBE2L3在調(diào)節(jié)NF-κB信號(hào)通路中的作用可能對(duì)免疫反應(yīng)和炎癥過(guò)程至關(guān)重要。
SETD7(SET domain containing 7)是依賴S-腺苷甲硫氨酸的組蛋白H3K4特異性甲基轉(zhuǎn)移酶,亦催化p53、TAF10等非組蛋白底物,在干細(xì)胞維持、代謝重編程及病抑制網(wǎng)絡(luò)中扮演“表觀開(kāi)關(guān)”角色。本品以昆蟲(chóng)細(xì)胞-桿狀病毒系統(tǒng)表達(dá)全長(zhǎng)催化域(aa 1-366),保留天然折疊與輔因子結(jié)合口袋;N端6×His標(biāo)簽經(jīng)Ni2?-NTA、離子交換兩步純化,SDS-PAGE與SEC-MALS顯示單體均一,純度≥98%;內(nèi)素<0.05 EU/μg,適配體外酶活、晶體學(xué)與細(xì)胞轉(zhuǎn)染。功能驗(yàn)證:在標(biāo)準(zhǔn)甲基化體系中,100 nM SETD7可在30 min內(nèi)將H3(1-21)肽段K4位單甲基化提升至85%,Km(SAM)=0.9 μM;ITC測(cè)定其輔因子結(jié)合熱力學(xué)ΔH=-8.6 kcal/mol,結(jié)構(gòu)模型與PDB 1O9S重疊RMSD<0.5 ?。His標(biāo)簽兼容SPR、AlphaLISA及Pull-down,可高通量篩選SAM競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑或底物模擬肽,加速糖尿病、病表觀治先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)。該重組蛋白為解析SETD7底物譜、開(kāi)發(fā)位點(diǎn)特異性甲基化調(diào)控策略提供了高活性、可規(guī)?;难芯考?jí)試劑。
RecombinantHumanSEZ6Protein,hFcTag:神經(jīng)突觸與病靶向治的跨界探針SEZ6(Seizure-related6)是一種腦富集的跨膜糖蛋白,在神經(jīng)元樹(shù)突棘形成和神經(jīng)母細(xì)胞瘤、小細(xì)胞肺病等神經(jīng)內(nèi)分泌病表面高表達(dá),被視為可內(nèi)吞的ADC理想靶點(diǎn)。本品由CHO-K1真核表達(dá)系統(tǒng)分泌,包含完整胞外結(jié)構(gòu)域(aa20-614),C端融合人IgG1Fc形成穩(wěn)定二聚體,經(jīng)ProteinA與分子篩兩步純化,SDS-PAGE非還原條帶≈220kDa,純度≥98%;內(nèi)素<0.05EU/μg,可直接用于小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。功能驗(yàn)證:ELISA顯示其與配體C1q樣蛋白復(fù)合物親和力KD=7.8nM;在SH-SY5Y細(xì)胞中,100ng/mL重組SEZ6-hFc可明顯促進(jìn)神經(jīng)元樣突起伸長(zhǎng)(平均長(zhǎng)度↑1.9倍)。此外,該蛋白與抗SEZ6抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,IC??=12nM,為ADC內(nèi)化效率評(píng)價(jià)提供定量標(biāo)準(zhǔn)。hFc標(biāo)簽兼容流式、SPR及免疫共沉淀,支持病表面抗原密度檢測(cè)、抗體藥篩選及神經(jīng)突觸形成機(jī)制研究,是連接神經(jīng)科學(xué)與病靶向治的質(zhì)量工具。UBE2L3與其他E2酶的區(qū)別在于它具有特定的結(jié)構(gòu)特征,它包含一個(gè)高度保守的UBC結(jié)構(gòu)域,這是E2酶家族的標(biāo)志。
重組人Skp1蛋白(His-Avi Tag)是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了His和Avi雙標(biāo)簽,便于純化和高靈敏度檢測(cè)。Skp1(S-phase kinase-associated protein 1)是SCF(Skp1-Cullin-F-box)泛素連接酶復(fù)合體的關(guān)鍵組分,廣參與細(xì)胞周期調(diào)控、蛋白質(zhì)降解和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物學(xué)過(guò)程。Skp1的功能與機(jī)制Skp1是SCF復(fù)合體的關(guān)鍵組成部分,通過(guò)與F-box蛋白結(jié)合,招募特定的底物蛋白,進(jìn)而促進(jìn)其泛素化修飾和降解。這一過(guò)程在細(xì)胞周期的G1/S期轉(zhuǎn)換、DNA損傷修復(fù)以及多種信號(hào)通路的調(diào)控中起著至關(guān)重要的作用。Skp1的功能異常與多種疾病的發(fā)長(zhǎng)發(fā)展密切相關(guān),包括病、神經(jīng)退行性疾病和發(fā)育障礙等。重組人Skp1蛋白(His-Avi Tag)的特點(diǎn)重組人Skp1蛋白(His-Avi Tag)具有以下明顯特點(diǎn):高純度:純度≥95%(經(jīng)SDS-PAGE和SEC-HPLC驗(yàn)證),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。低內(nèi)素:內(nèi)素水平<0.1 EU/μg,適合用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)研究。雙標(biāo)簽設(shè)計(jì):His標(biāo)簽便于通過(guò)Ni-NTA磁珠進(jìn)行快速純化;Avi標(biāo)簽可在體外被BirA酶定點(diǎn)生物素化,結(jié)合鏈霉親和素(Streptavidin)實(shí)現(xiàn)極高的檢測(cè)靈敏度和特異性。該產(chǎn)品采用基于核酸適配體的Hot-Start技術(shù),抑制酶在低溫下的活性,防止非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成。NotI內(nèi)切酶
Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,能夠在95°C的高溫下保持活性,適合PCR反應(yīng)的高溫變性步驟。AccI
重組人TNFRSF12A蛋白是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了hFc標(biāo)簽,便于純化和檢測(cè)。TNFRSF12A(Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Member 12A),也稱為TWEAKR或Fn14,是TNF受體超家族的重要成員,廣參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞存活和組織修復(fù)。它在多種生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,尤其是在炎癥和瘤微環(huán)境中。TNFRSF12A的功能與機(jī)制TNFRSF12A通過(guò)其胞外區(qū)與配體TWEAK(TNF-like weak inducer of apoptosis)結(jié)合,啟動(dòng)下游的信號(hào)通路。TWEAK是一種多功能細(xì)胞因子,能夠通過(guò)TNFRSF12A調(diào)節(jié)多種細(xì)胞類型的功能。TNFRSF12A的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)依賴于其胞內(nèi)段的結(jié)構(gòu)域,能夠啟動(dòng)NF-κB、MAPK和JNK等信號(hào)通路,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的存活、增殖和炎癥反應(yīng)。在炎癥條件下,TNFRSF12A的高表達(dá)與組織損傷和修復(fù)密切相關(guān)。此外,TNFRSF12A在瘤微環(huán)境中也發(fā)揮重要作用,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的存活和血管生成。重組人TNFRSF12A蛋白(hFc Tag)的特點(diǎn)重組人TNFRSF12A蛋白(hFc Tag)具有以下明顯特點(diǎn):高純度:純度≥95%(經(jīng)SDS-PAGE和SEC-HPLC驗(yàn)證),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。低內(nèi)素:內(nèi)素水平<0.1 EU/μg,適合用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)研究。AccI