在分子生物學實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實現(xiàn)高保真、高效擴增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Phusion DNA聚合酶的保真性與優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個便捷、可靠的實驗平臺。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Phusion DNA聚合酶以其高保真性著稱,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的優(yōu)先工具。此外,Phusion酶的延伸速度可達15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,明顯提高了實驗效率。預(yù)混液的無染料配方為實驗提供了更大的靈活性。實驗人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,而無需擔心染料對結(jié)果的干擾。這種無染料設(shè)計特別適合需要進一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M行下游功能分析。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)經(jīng)過嚴格的穩(wěn)定性測試,即使在反復(fù)凍融后仍能保持穩(wěn)定的活性。Recombinant Mouse CLEC14A Protein,His Tag
在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AseI 便是其中一位“精細剪刀”。它以其獨特的識別序列和精細的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學研究中發(fā)揮著重要作用。AseI 的識別序列是“AT^TTAAT”,這一序列在基因組中相對常見,使得 AseI 能夠在多個位點進行切割。它會在“^”標記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得 AseI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨特的優(yōu)勢。在基因工程中,AseI 的應(yīng)用極為廣??茖W家可以利用它將目標基因從復(fù)雜的基因組中精細地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達目標蛋白的重組載體。這種精細的切割能力使得 AseI 成為處理復(fù)雜基因組時的理想選擇。AseI 的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AseI 對不同 DNA 樣本的切割模式,科學家可以分析基因的多態(tài)性,進而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,AseI 可以用來檢測基因突變,幫助科學家更好地理解疾病的遺傳機制。AseI 的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學領(lǐng)域的一大進步。Recombinant Human TYRO3 Protein,His Tag牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I應(yīng)儲存在-20°C的環(huán)境中,這有助于保持其活性。在這種條件下,該酶可以保存長達3年。
在生物科學的浩瀚宇宙中,AatII酶猶如一顆璀璨的星辰,以其獨特的功能閃耀著。它是一種限制性核酸內(nèi)切酶,宛如一位精細的“裁縫”,專門在DNA分子上施展“剪裁”技藝。AatII酶的識別序列是“GACGT”,一旦它在DNA鏈上找到這個特定的“密碼”,便會毫不猶豫地在序列的特定位置將DNA鏈切斷。這種精細的切割能力,讓它在基因工程領(lǐng)域大放異彩??茖W家們可以利用它將目標基因從復(fù)雜的基因組中精細地“剪切”出來,就像從一幅巨大的拼圖中精確地取出需要的那一塊。在構(gòu)建基因表達載體時,AatII酶更是不可或缺的助手。它可以將目的基因與載體DNA在特定位置切開,然后通過DNA連接酶將它們無縫拼接在一起,從而構(gòu)建出能夠高效表達目標蛋白的重組載體。這就好比將一段珍貴的旋律嵌入到一個完美的樂章之中,讓其得以在細胞內(nèi)奏響生命的樂章。AatII酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用,極大地推動了基因工程的發(fā)展。它就像是生物技術(shù)領(lǐng)域的一把“神奇剪刀”,讓科學家們能夠更加精細地操作DNA,為基因、生物制藥等領(lǐng)域開辟了廣闊的道路。它雖微小,卻承載著人類對生命奧秘探索的宏大夢想,為生物科學的進步貢獻著不可替代的力量。
重組人LCAT蛋白(Recombinant Human LCAT Protein, His Tag)是一種關(guān)鍵的脂質(zhì)代謝酶,全稱為卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(Lecithin-Cholesterol Acyltransferase),主要由肝臟合成并分泌至血漿中。LCAT在膽固醇逆向轉(zhuǎn)運過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,能夠?qū)⒏呙芏戎鞍祝℉DL)中的游離膽固醇酯化,促進膽固醇從外周組織向肝臟轉(zhuǎn)運,從而維持體內(nèi)脂質(zhì)平衡,預(yù)防等心血管疾病的發(fā)生。該重組蛋白采用真核表達系統(tǒng)(如HEK293細胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標簽,便于通過Ni-NTA親和層析進行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實驗操作,如酶活性分析、脂質(zhì)代謝研究及藥物篩選等。研究表明,LCAT活性異常與多種疾病密切相關(guān),包括家族性LCAT缺乏癥、、病及代謝綜合征等。因此,重組人LCAT蛋白不僅是研究脂質(zhì)代謝機制的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價值。Endo H 是一種糖蛋白特異性的酶,主要作用于含有 N - 連接寡糖鏈的糖蛋白,對其他類型的生物大分子如核酸。
SEMA4B屬IV類跨膜信號素,兼具軸突排斥與T細胞共抑制雙重功能,在阿爾茨海默病、肺病及結(jié)直腸病中表達失衡。本品利用HEK293真核表達系統(tǒng),完整覆蓋胞外Sema域及PSI-IPT連接區(qū)(aa 1-712),C端6×His標簽經(jīng)Ni-NTA與SEC兩步純化,SDS-PAGE呈單一條帶,純度≥97%;內(nèi)素<0.03 EU/μg,適配小鼠體內(nèi)實驗。鈣離子依賴性ELISA顯示,其與Plexin-B2親和力KD=9.2 nM,可阻斷Plexin-B2介導的神經(jīng)元生長錐塌陷(IC??=60 ng/mL)。在CT26荷瘤模型中,腹腔注射20 μg重組SEMA4B,病浸潤CD8? T細胞比例提升2.6倍,同時PD-1表達下調(diào)30%,提示免疫剎車解除。His標簽支持BLI、SPR及免疫共沉淀,可高通量篩選阻斷抗體或降解劑。該蛋白為解析SEMA4B在神經(jīng)—免疫交叉對話中的分子機制,及開發(fā)靶向腫瘤免疫微環(huán)境的新型生物制劑,提供了高活性、標準化的研究級試劑。Cas9 NLS在Cas9蛋白的N端和C端都含有SV40 T抗原的核定位序列,這使得Cas9與gRNA形成的復(fù)合物。Bak BH3
與Taq DNA Polymerase不同,Pfu DNA Polymerase產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,無3'端"A"突出。Recombinant Mouse CLEC14A Protein,His Tag
Taq DNA聚合酶:分子生物學的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動了基因擴增、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實現(xiàn)高效的循環(huán)擴增。近年來,科學家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實驗需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長片段PCR擴增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測多個靶點。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡化了DNA擴增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測和個性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強大的技術(shù)支持。Recombinant Mouse CLEC14A Protein,His Tag