超臨界 CO?萃取作為綠色提取技術(shù)，在小白菊內(nèi)酯生產(chǎn)中展現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)，尤其適用于高純度提取物的制備。工業(yè)化裝置采用 500L 萃取釜，配套分離釜（Ⅰ 級(jí)、Ⅱ 級(jí)）與 CO?循環(huán)系統(tǒng)，工藝參數(shù)經(jīng)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化：萃取壓力 30MPa，溫度 40℃，CO?流量 20kg/h，萃取時(shí)間 3 小時(shí)，夾帶劑（95% 乙醇）用量 10%（占原料質(zhì)量）。萃取過程中，CO?在超臨界狀態(tài)下滲透進(jìn)入原料細(xì)胞，溶解小白菊內(nèi)酯后，經(jīng)減壓進(jìn)入分離釜 Ⅰ（壓力 8MPa，溫度 35℃），大部分 CO?液化循環(huán)使用；含產(chǎn)物的夾帶劑進(jìn)入分離釜 Ⅱ（壓力 5MPa，溫度 45℃），乙醇與產(chǎn)物分離，得到粗提物。該工藝的小白菊內(nèi)酯純度達(dá) 35-40%（傳統(tǒng)乙醇提取粗品純度 20-25%），且無(wú)溶劑殘留（符合 ICH Q3C 標(biāo)準(zhǔn)）。中試數(shù)據(jù)顯示，500L 裝置每批次處理原料 50kg，得粗提物 1.2kg，提取率 0.85%，單位能耗較溶劑法降低 30%，已實(shí)現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)。其對(duì)免疫細(xì)胞活性的調(diào)節(jié)，助力疾病研究。東營(yíng)小白菊內(nèi)酯

小白菊內(nèi)酯的臨床研究始于 2000 年前后，早期主要集中在偏領(lǐng)域。2004 年，英國(guó)一項(xiàng)多中心隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)（n=240）顯示，小白菊提取物（含小白菊內(nèi)酯 2.5mg / 天）偏的有效率達(dá) 68%，高于安慰劑組（32%），且不良反應(yīng)發(fā)生率 8%（主要為胃腸道不適）。2010 年后，臨床研究向炎癥性疾病拓展。2016 年，針對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的 Ⅱ 期臨床試驗(yàn)（n=180）結(jié)果顯示，小白菊內(nèi)酯（50mg / 天）聯(lián)合甲氨蝶呤的總有效率達(dá) 75%，較單獨(dú)使用甲氨蝶呤（52%）顯著提高，且能減少用量。2022 年，銀屑病臨床研究取得進(jìn)展，局部涂抹小白菊內(nèi)酯凝膠（0.5%）12 周，PASI 評(píng)分改善率達(dá) 58%，安全性良好。目前，小白菊內(nèi)酯的臨床應(yīng)用形式多樣，包括口服制劑（膠囊、片劑）、外用制劑（凝膠、乳膏）和注射劑。其中，口服制劑已在歐洲作為非藥用于偏預(yù)防，外用制劑在韓國(guó)獲批用于炎癥性皮膚病，注射劑處于 Ⅰ 期臨床研究階段（評(píng)估安全性）。東營(yíng)小白菊內(nèi)酯小白菊內(nèi)酯可干擾細(xì)胞增殖過程，有望成新利器。

小白菊內(nèi)酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)解析是其發(fā)展的關(guān)鍵里程碑。通過 X 射線單晶衍射技術(shù)，科學(xué)家確定其分子結(jié)構(gòu)包含一個(gè)十元環(huán)倍半萜骨架，帶有 α- 亞甲基 -γ- 內(nèi)酯和環(huán)氧基團(tuán)兩個(gè)活性官能團(tuán)。α- 亞甲基 -γ- 內(nèi)酯結(jié)構(gòu)能與親核試劑發(fā)生邁克爾加成反應(yīng)，是其與生物靶點(diǎn)結(jié)合的關(guān)鍵位點(diǎn)；環(huán)氧基團(tuán)則通過與巰基反應(yīng)增強(qiáng)分子活性。構(gòu)效關(guān)系研究顯示，結(jié)構(gòu)修飾對(duì)活性影響。2003 年，德國(guó)慕尼黑大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)合成了 30 余種衍生物，發(fā)現(xiàn)保留 α- 亞甲基 -γ- 內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的同時(shí)，在 C-11 位引入羥基可增強(qiáng)活性（IC??從 2.3μM 降至 1.1μM）；而環(huán)氧基團(tuán)開環(huán)則導(dǎo)致活性喪失（抑制率下降 70%）。2010 年，中國(guó)藥科大學(xué)團(tuán)隊(duì)通過計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)，預(yù)測(cè)小白菊內(nèi)酯與 NLRP3 炎癥小體的結(jié)合模式，為靶向修飾提供理論指導(dǎo)。這些研究為定向改造分子結(jié)構(gòu)、優(yōu)化藥理活性奠定基礎(chǔ)，目前已有 12 種小白菊內(nèi)酯衍生物進(jìn)入臨床前研究，其中 3 種因選擇性提高 10 倍以上而備受關(guān)注。

小白菊內(nèi)酯的藥代動(dòng)力學(xué)研究顯示，其口服生物利用度較低（約 15-20%），主要原因是水溶性差和腸道代謝。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，大鼠灌胃給藥（50mg/kg）后，血藥濃度達(dá)峰時(shí)間（Tmax）為 1.5 小時(shí)，峰濃度（Cmax）為 0.8μg/mL，半衰期（t?/?）為 3.2 小時(shí)，提示需頻繁給藥維持療效。靜脈注射給藥（10mg/kg）的藥時(shí)曲線下面積（AUC）為 12.5μg?h/mL，分布，在肝、腎、肺中濃度較高，腦內(nèi)也可檢測(cè)到（約為血藥濃度的 15%），為其神經(jīng)保護(hù)作用提供藥代學(xué)基礎(chǔ)。代謝研究發(fā)現(xiàn)，小白菊內(nèi)酯在體內(nèi)主要通過羥基化和葡萄糖醛酸結(jié)合代謝，生成 3 種主要代謝產(chǎn)物，均無(wú)活性，提示需通過劑型改造提高其穩(wěn)定性和生物利用度，如納米膠束制劑可使口服生物利用度提升至 58%。小白菊內(nèi)酯能調(diào)節(jié)基因表達(dá)，影響細(xì)胞的功能和命運(yùn)。

微生物合成小白菊內(nèi)酯的研究始于 21 世紀(jì)初。2008 年，美國(guó)斯坦福大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)在大腸桿菌中重構(gòu)了小白菊內(nèi)酯的前體合成通路，通過表達(dá)法尼烯合酶，實(shí)現(xiàn)前體法尼烯的產(chǎn)量達(dá) 50mg/L，但未能合成小白菊內(nèi)酯。2013 年，酵母細(xì)胞工廠取得突破，通過導(dǎo)入 3 個(gè)關(guān)鍵酶基因（倍半萜合酶、環(huán)氧酶、氧化酶），實(shí)現(xiàn)小白菊內(nèi)酯的從頭合成，產(chǎn)量達(dá) 12μg/L。2017 年，合成生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用使產(chǎn)量實(shí)現(xiàn)跨越式增長(zhǎng)?？蒲腥藛T通過模塊化優(yōu)化代謝網(wǎng)絡(luò)，在釀酒酵母中平衡前體供應(yīng)與產(chǎn)物合成，產(chǎn)量提升至 520μg/L；2021 年，采用動(dòng)態(tài)調(diào)控系統(tǒng)（基于群體感應(yīng)元件）避免中間產(chǎn)物毒性，產(chǎn)量突破 3.2mg/L。目前，實(shí)驗(yàn)室水平的比較高產(chǎn)量達(dá) 8.5mg/L（2023 年），較 2013 年提升 700 倍。微生物合成技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于可調(diào)控性強(qiáng)，通過發(fā)酵條件優(yōu)化（溫度、pH、溶氧量），能快速響應(yīng)市場(chǎng)需求。預(yù)計(jì)未來 5 年，隨著菌株改造技術(shù)的成熟，微生物合成成本有望降至植物提取法的 1/3，成為主流生產(chǎn)方式之一。其在神經(jīng)保護(hù)方面的作用，為相關(guān)疾病帶來希望。東營(yíng)小白菊內(nèi)酯

其在炎癥相關(guān)疾病方面，具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。東營(yíng)小白菊內(nèi)酯

小白菊內(nèi)酯的安全性評(píng)價(jià)顯示，其窗較寬，小鼠急性經(jīng)口 LD??為 380mg/kg，大鼠亞慢性毒性試驗(yàn)（3 個(gè)月，50mg/kg/ 天）未發(fā)現(xiàn)明顯臟器損傷。臨床研究中，口服小白菊提取物（含小白菊內(nèi)酯 2.5mg / 天）的不良反應(yīng)發(fā)生率 8%，主要為輕度胃腸道不適（惡心、腹瀉），停藥后可緩解。但高劑量下（＞100mg/kg）可能產(chǎn)生細(xì)胞毒性，表現(xiàn)為骨髓抑制和肝酶升高，這與其對(duì)快速增殖細(xì)胞的抑制作用相關(guān)。特殊人群安全性方面，孕婦應(yīng)避免使用，因動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示高劑量可能影響胚胎發(fā)育；哺乳期婦女用藥需謹(jǐn)慎，尚無(wú)乳汁分泌數(shù)據(jù)?？傮w而言，小白菊內(nèi)酯的安全性良好，合理使用可降低風(fēng)險(xiǎn)，其毒性機(jī)制和安全劑量仍需進(jìn)一步臨床研究確認(rèn)。東營(yíng)小白菊內(nèi)酯