細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。為什么要進(jìn)行細(xì)胞凍存?連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細(xì)胞系較終會(huì)發(fā)生衰老,所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染,即使運(yùn)轉(zhuǎn)情況較好的實(shí)驗(yàn)室也會(huì)遇到設(shè)備故障的問(wèn)題。由于已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源,更換細(xì)胞系成本高昂,而且耗費(fèi)時(shí)間,因此,十分有必要將細(xì)胞冷凍起來(lái)長(zhǎng)期保存。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:不含牛血清,無(wú)動(dòng)物源組分。南昌無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個(gè)方式,還可選擇20%的DMSO機(jī)上80%的小牛血清,配成兩倍的儲(chǔ)存液,在使用時(shí)細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用細(xì)胞凍存液需要注意以下幾點(diǎn):1、在使用凍存液前,需要確保細(xì)胞凍存液已經(jīng)完全融化,并要輕輕的混勻。對(duì)融化后的細(xì)胞凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。2、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細(xì)胞生長(zhǎng)情況比較良好,比如說(shuō)細(xì)胞需要處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,并且凍存的時(shí)候存活率大于90%。3、在使用細(xì)胞凍存液期間,為了保證可以發(fā)揮較佳的效果,建議將細(xì)胞凍存在液氮之中,這樣可以長(zhǎng)時(shí)間的進(jìn)行保存。如果說(shuō)將細(xì)胞置于-80℃的環(huán)境下保存,那么保存的時(shí)間大約為1年。4、細(xì)胞凍存液如果需要做標(biāo)記的話,要使用耐受有機(jī)溶劑的馬克筆進(jìn)行標(biāo)記,以防被酒精或異丙醇等擦掉,不能辨識(shí)。蕪湖無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家批發(fā)價(jià)無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可直接存放于-80℃冰箱凍存,無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程(省時(shí)、省錢)。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液:解凍解凍后,應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔。1.開(kāi)始之前,提前準(zhǔn)備好以下材料:試管,恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基,預(yù)先包被的培養(yǎng)板,確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2.在37°C水浴中快速解凍,持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管,直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài)。3.水浴中取出凍存管,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15mL的錐形試管。注意:用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。
無(wú)血清凍存液注意事項(xiàng):1、請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后,請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞,請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。無(wú)血清凍存液特性:1.不含動(dòng)物成分。2.不需回溫,完全即用型。3.適合各種動(dòng)物細(xì)胞。4.適合無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞與含血清培養(yǎng)細(xì)胞。5.復(fù)蘇細(xì)胞存活率高。無(wú)血清凍存液用途:1、無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。2、細(xì)胞保藏中心,無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存。3、科研高校,無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株凍存。4、無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫(kù)細(xì)胞樣本保存。無(wú)血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件:1、置于2~8℃避光保存,有效期為1年;置于-20℃保存,有效期為3年;2、本產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超過(guò)保質(zhì)期,必須放棄使用;3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量,請(qǐng)避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:當(dāng)溫度進(jìn)一步下降,細(xì)胞內(nèi)外都結(jié)冰,產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑,則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因?yàn)槔鋬霰Wo(hù)劑容易同溶液中的水分子結(jié)合,從而降低冰點(diǎn),減少冰晶的形成,并且通過(guò)其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷,細(xì)胞得以在較低溫條件下保存。在復(fù)蘇時(shí),一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫,細(xì)胞內(nèi)外不會(huì)重新形成較大的冰晶,也不會(huì)暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過(guò)長(zhǎng)的時(shí)間,從而無(wú)冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生,凍存的細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。冷凍保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞的冷凍保護(hù)效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復(fù)溫速率有關(guān)。而且不同的冷凍保護(hù)劑其冷凍保護(hù)效果也不一樣。無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法:按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。鄭州正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
1000 rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細(xì)胞沉淀。南昌無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液細(xì)胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時(shí),可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。南昌無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家