外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過(guò)細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過(guò)程發(fā)揮關(guān)鍵作用，不同細(xì)胞來(lái)源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：無(wú)需蛋白酶處理。合肥外泌體提取試劑平均價(jià)格

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范、統(tǒng)一定量及鑒定等。關(guān)于外泌體的提取有超速離心、試劑盒、超濾法、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣，費(fèi)事費(fèi)力，而且步驟多導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中容易污染，且損耗量大，使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定。而且對(duì)于抽提細(xì)胞上清來(lái)說(shuō)，更是極為不請(qǐng)便，試想用提取300ml的上清需要6個(gè)50ml離心管，無(wú)論是過(guò)濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀，都具有操作極其不便的缺點(diǎn)，總之非常麻煩。而超濾法存在外泌體會(huì)堵塞膜孔，造成濃縮效率低，濃縮管重復(fù)利用差，甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會(huì)粘連成團(tuán)，造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差，對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)也有影響廣州外泌體提取試劑直銷(xiāo)廠家外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合。

目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為，外泌體的產(chǎn)生過(guò)程為：細(xì)胞膜內(nèi)陷，形成內(nèi)體（endosome），再形成多泡體（multivesicularbodies，MVB），較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類(lèi)、DNA和RNA等重要信息。外泌體較早見(jiàn)于1981年，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，并命名為exosome。對(duì)于外泌體的作用，當(dāng)時(shí)推測(cè)為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類(lèi)似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle），所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過(guò)外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來(lái)越多，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、一些病癥生長(zhǎng)于侵襲等各種生物過(guò)程中。目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時(shí)，量少。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷外泌體的提取有超速離心、試劑盒、超濾法、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊。

具膜囊泡，當(dāng)我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時(shí)不推薦使用其他的名稱(chēng)來(lái)稱(chēng)呼它們。外泌體（exosome）適用于通過(guò)特殊手段拿到的由胞內(nèi)體來(lái)源的釋放到細(xì)胞外的膜泡結(jié)構(gòu)。建議對(duì)細(xì)胞外囊泡進(jìn)行細(xì)分時(shí)使用物理上的界定如小細(xì)胞外囊泡（sEV）和中/大細(xì)胞外囊泡（m/lEV），或者高密度囊泡（highdensity）和低密度囊泡（lowdensity）等，同時(shí)也建議使用表面蛋白來(lái)界定如CD63+CD81+細(xì)胞外囊泡等。當(dāng)使用exosomes等稱(chēng)呼時(shí)應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)證明使用的“exosomes樣品”是由胞內(nèi)體途徑產(chǎn)生的。小和同學(xué)：都是細(xì)胞外囊泡，外泌體和微囊泡有啥區(qū)別？小光老師：外泌體和微囊泡的區(qū)別在于其生成的方式不同。從晚期內(nèi)體來(lái)源產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡稱(chēng)為外泌體，從細(xì)胞膜直接出芽產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡稱(chēng)為微囊泡。外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器。廈門(mén)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)

目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離。合肥外泌體提取試劑平均價(jià)格

外泌體的提取、分離方法：梯度密度離心法。研究發(fā)現(xiàn)，外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間，因此，可以采用密度梯度離心法來(lái)分離外泌體。該方法是將超速離心結(jié)合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結(jié)合，原理是先除去非囊泡物質(zhì)，再通過(guò)梯度密度濃縮提取外泌體，該方法可以得到相對(duì)較為純凈的外泌體。傳統(tǒng)的梯度密度方法通常需要離心16h，但是2012年，研究者[15]使用了62~90h才分離出某些確切囊泡，因此，該方法可能不足以沉淀所有的外泌體。如果離心時(shí)間不充足，污染物質(zhì)可能和外泌體保持在相同的密度層，特別是這個(gè)密度范圍又比較寬。合肥外泌體提取試劑平均價(jià)格