L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必要的一種營養(yǎng),但其在溶液中不安定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細(xì)胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不會自發(fā)的降解。細(xì)胞運(yùn)用其機(jī)制是:在細(xì)胞培訓(xùn)時(shí),細(xì)胞會日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細(xì)胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收運(yùn)用。細(xì)胞運(yùn)用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)方針相像,連續(xù)的將低濃度水準(zhǔn)的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成剩余的氨,更有利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細(xì)胞,幾乎無須適應(yīng),并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間,縮減傳代次數(shù),即節(jié)約了時(shí)間也節(jié)省了錢財(cái)。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓(xùn)的細(xì)胞相比之下,活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時(shí)間。NEAA(非須要氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能下降細(xì)胞培育時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非須要氨基酸的副作用,有效性推動細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需。McCoy’s 5A常用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng),如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網(wǎng)膜等。江西醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供
DMEM 培養(yǎng)基具備多種實(shí)用配方,以滿足不同細(xì)胞的生長需求。其中,高糖型(葡萄糖濃度 4500mg/L)和低糖型(葡萄糖濃度 1000mg/L)為常見。高糖型 DMEM 培養(yǎng)基猶如為代謝旺盛的細(xì)胞量身定制,為其提供充足的能量來源,促使細(xì)胞快速生長、增殖,尤其適用于像腫瘤細(xì)胞這類生長迅猛、對能量需求高的細(xì)胞。而低糖型 DMEM 培養(yǎng)基則更契合代謝較為緩慢的細(xì)胞,為它們營造溫和穩(wěn)定的生長環(huán)境,保障細(xì)胞正常代謝與功能維持,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,科研人員可依據(jù)細(xì)胞特性靈活選用合適配方。四川細(xì)胞培養(yǎng)基廠家針對細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的 McCoy’s 5A改良培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方。
在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)踐中,選擇合適的 DMEM 培養(yǎng)基至關(guān)重要。對于生長較快、粘附性低的細(xì)胞,如某些腫瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞,高糖型 DMEM 培養(yǎng)基是理想之選,其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細(xì)胞對能量的高需求,促進(jìn)細(xì)胞快速生長。而對于一些原代細(xì)胞,因其對培養(yǎng)環(huán)境更為敏感,可能需要低糖型 DMEM 培養(yǎng)基,并根據(jù)細(xì)胞來源和特性添加特定的生長因子、營養(yǎng)補(bǔ)充劑等,定制專屬培養(yǎng)方案,為原代細(xì)胞提供**適宜的生長條件,提高原代細(xì)胞培養(yǎng)的成功率。Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍。
隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細(xì)胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時(shí)間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響??捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。RPMI RPMI 1640 培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨(dú)特的效果,是因?yàn)槠渲泻羞€原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。海南DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基廠家
Ham’s F-10適合用于人二倍體細(xì)胞的培養(yǎng),低血清條件下細(xì)胞的克隆化培養(yǎng),及動物的原代細(xì)胞培養(yǎng)。江西醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供
RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨(dú)特的效果,是因?yàn)槠渲泻羞€原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。
L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細(xì)胞,幾乎無需適應(yīng),并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間,減少傳代次數(shù),即節(jié)省了時(shí)間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時(shí)間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天。門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。 江西醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供
深圳市華晨陽科技有限公司在同行業(yè)領(lǐng)域中,一直處在一個不斷銳意進(jìn)取,不斷制造創(chuàng)新的市場高度,多年以來致力于發(fā)展富有創(chuàng)新價(jià)值理念的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn),在廣東省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的商業(yè)口碑,成績讓我們喜悅,但不會讓我們止步,殘酷的市場磨煉了我們堅(jiān)強(qiáng)不屈的意志,和諧溫馨的工作環(huán)境,富有營養(yǎng)的公司土壤滋養(yǎng)著我們不斷開拓創(chuàng)新,勇于進(jìn)取的無限潛力,深圳市華晨陽科技供應(yīng)攜手大家一起走向共同輝煌的未來,回首過去,我們不會因?yàn)槿〉昧艘稽c(diǎn)點(diǎn)成績而沾沾自喜,相反的是面對競爭越來越激烈的市場氛圍,我們更要明確自己的不足,做好迎接新挑戰(zhàn)的準(zhǔn)備,要不畏困難,激流勇進(jìn),以一個更嶄新的精神面貌迎接大家,共同走向輝煌回來!