Ham’sF-12營養(yǎng)混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計而成的，初用于CHO細(xì)胞的無血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，在低血清含量下時，特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)，添加血清后也廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng)，如大鼠肝細(xì)胞、大鼠前列腺上皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、大鼠成肌細(xì)胞、雞胚胎細(xì)胞等。此外，Ham’sF-12與DMEM等體積混合后，得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富，使用更為較廣。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要，隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。 靈活適配血清/無血清培養(yǎng)，DMEM/F12助力定制化實驗方案。黑龍江實驗細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細(xì)胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定，不會自發(fā)的降解。細(xì)胞利用其機(jī)制是：在細(xì)胞培養(yǎng)時，細(xì)胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細(xì)胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。細(xì)胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似，連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成多余的氨，更利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨?？梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺，適用于所有的細(xì)胞，幾乎無需適應(yīng)，并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時間，減少傳代次數(shù)，即節(jié)省了時間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比，活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要。江西醫(yī)療細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨Fischer’s培養(yǎng)基是Glen Fischer在美國國家ai癥研究所設(shè)計的，初用于小鼠白血病細(xì)胞的培養(yǎng)。

    1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強(qiáng)，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜，來源受限且制作過程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。

在細(xì)胞培養(yǎng)實踐中，選擇合適的 DMEM 培養(yǎng)基至關(guān)重要。對于生長較快、粘附性低的細(xì)胞，如某些腫瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞，高糖型 DMEM 培養(yǎng)基是理想之選，其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細(xì)胞對能量的高需求，促進(jìn)細(xì)胞快速生長。而對于一些原代細(xì)胞，因其對培養(yǎng)環(huán)境更為敏感，可能需要低糖型 DMEM 培養(yǎng)基，并根據(jù)細(xì)胞來源和特性添加特定的生長因子、營養(yǎng)補(bǔ)充劑等，定制專屬培養(yǎng)方案，為原代細(xì)胞提供**適宜的生長條件，提高原代細(xì)胞培養(yǎng)的成功率。McCoy’s 5A培養(yǎng)基是Thomas McCoy等人在1959年設(shè)計的培養(yǎng)基，初專門用于Novikoff Hepatoma細(xì)胞的培養(yǎng)。

    Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進(jìn)型，在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度，降低了葡萄糖的用量，并修改了鹽的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。葡萄糖可以根據(jù)研究需要，隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑，對細(xì)胞無毒性作用，添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響。可用于無CO2培養(yǎng)箱。 Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。重慶iclean細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家

即用型DMEM/F12，確保細(xì)胞活力與實驗結(jié)果可靠性。黑龍江實驗細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供

    Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進(jìn)型，在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度，降低了葡萄糖的用量，并修改了鹽的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn)，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時（如乳腺組織），比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細(xì)胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染**常用的***，其中，青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。 黑龍江實驗細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供

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