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二、生化及免疫學(xué)檢驗:5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L?!九R床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關(guān)?,F(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪、精囊功能正常。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,則提示精囊功能障礙,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,果糖含量正常,說明附睪功能障礙,精囊功能正常;而肉堿急劇下降,果糖含量亦減少,表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性。【臨床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動,干擾精子的運行,阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精,也可能影響發(fā)育中的胚胎,造成免疫性流產(chǎn)。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時,系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優(yōu)點。全自動化精子分析ALH
通過比較進行質(zhì)量評估1.室內(nèi)比較是采用同一個標(biāo)本在同一參數(shù)下?經(jīng)CASA多次測定后?應(yīng)用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)方法對測得數(shù)值進行比較。在男科實驗室中對CASA系統(tǒng)的質(zhì)量控制通常使用影像磁帶或完全相同的凍存**標(biāo)本進行日間比較。當(dāng)室內(nèi)比較作為結(jié)果質(zhì)量的一種評估時?計算機中數(shù)值的在線獲得是極具優(yōu)勢的。2.室間比較要求標(biāo)本向其他幾個實驗室運送文獻中的一些報道闡述了該方面的經(jīng)驗但是運動精子是不能在不受限制的條件下運輸?shù)膶⑵渲糜谝旱羞\送需進一步考慮更多的因素(解凍技術(shù)、標(biāo)本的處理等)這些因素會影響活動力參數(shù);到目前為止室間比較的研究還未見滿意報道;Jorgensen等進行了研究嘗試克服實驗室間運送解凍標(biāo)本的困難其研究方式是:邀請四個實驗室的實驗人員攜帶各自的儀器到同一個地點以各自通常采用的實驗方法進行精子評估但未見明確的結(jié)論。3.對于精子活力測定CASA系統(tǒng)的測定與直觀評估的比較有文獻進行了報道但結(jié)果并不相同。認(rèn)為直觀評估揭示標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值且其差異是由CASA系統(tǒng)的錯誤引起的該觀點是不正確的;無論從理論上還是實踐中CASA數(shù)值比直觀評估所獲得的數(shù)值更接近于真值;對直線前進的精子比例而言這一點是非常正確的。美國濃度精子分析ALH精子分析儀節(jié)省時間,提高實驗室的工作效率,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實驗分析結(jié)果。
檢查具備條件受檢者,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,禁房事5-7天(上次排精到取標(biāo)本間隔時間至少不得少于100小時);[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,以**方式獲取精液,一次全部射入容器,蓋上蓋,記錄標(biāo)本離體時間;貼身保溫,30分鐘內(nèi)送到化驗室,并向檢驗員提供標(biāo)本取出時間。精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽?,精子活動情況,精子密度(個/毫升),精液液化時間(標(biāo)本取出到精液液化的時間),不動精子(個/高倍視野)等。見不動精子,須染色方可區(qū)分:不活動的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗,仍然找不到精子;方可報告無精。經(jīng)三次取樣化驗,結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。
ivos自動精子分析系統(tǒng)hamiltonthorne的casa系統(tǒng)適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)??梢詰?yīng)用于包括人類、公牛、馬、、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。全自動的ivos可以提供快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜?fù)的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。ivos能提供:、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果高速分析,在60hz下半秒掃描30幀為實驗室節(jié)省成本。高等級數(shù)據(jù)安全。(順應(yīng)美國fda的操作軟件)數(shù)據(jù)結(jié)果包括:計數(shù)、濃度。運動以及前進運動三種速度參數(shù)vap,vsl和vcl,外加運動參數(shù)lin,alh,str和bcf。內(nèi)置質(zhì)控保證分析精度可以回放精子活動,標(biāo)記不同狀態(tài)精子。迅速根據(jù)新的設(shè)定對上次分析結(jié)果進行重新計算,此過程不會損失畫面。形態(tài)可選附件:三維嚴(yán)謹(jǐn)形態(tài)(人類):的經(jīng)過認(rèn)證的嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男螒B(tài)分析。用戶自定義形態(tài)。即時形態(tài)分析熒光可選附件:自定義熒光(只有ivos)可以用濾光片的casa系統(tǒng)。高精度的計數(shù)。同時在氙氣燈析運動和靜止,使用各種熒光染色,自動探測計數(shù)染色細(xì)胞,自動歸類,可選彩色攝像頭。通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算,從而得出精子動靜態(tài)各項參數(shù)。
CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗應(yīng)用中的功能要求和參數(shù)設(shè)置CASA是將現(xiàn)代化的計算機技術(shù)和先進的圖象處理技術(shù)應(yīng)用于精子質(zhì)量的臨床檢驗,通過對精子動(靜)態(tài)圖象中精子特性的***分析,為臨床提供有關(guān)精子質(zhì)量各項指標(biāo)的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。CASA系統(tǒng)一般包括硬件和計算機軟件支持系統(tǒng)幾個部分:(1)相差顯微鏡、恒溫裝置和**技術(shù)板(Makler板、Macro板或MicroCell計數(shù)池等);(2)高速、高分辨率的攝像機和電視監(jiān)視器組成的攝像系統(tǒng);(3)計算機分析處理系統(tǒng)及打印機打印輸出。傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,準(zhǔn)確率有待提高。濃度精子分析DSL
男性精液檢測主要依賴計算機輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses,CASA)。全自動化精子分析ALH
精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數(shù),對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,由計算機處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測[1]。優(yōu)點:操作簡便,用量少,檢測速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運動狀態(tài)的多種參數(shù)等。缺點:影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。全自動化精子分析ALH